Susceptibility to carbapenems in 238 isolates of Pseudomonas spp. recovered from environmental samples was investigated. In 198 (128 isolates with intermediate sensitivity / resistance to imipenem (IMP) and / or meropenem (MER) and 70 susceptible to both antimicrobials) of the 238 isolates studied, the production of carbapenemases was investigated phenotypically and genotypically. 8.8% of the isolates were resistant to IMP and 25.2% to MER. Nine strains recovered from water showed phenotypically the production of MBL. All of them were identified as P. otitidis. The genes blaIMP, blaSPM, blaVIM, blaKPC, or blaNDM were not detected in none of these isolates. The presence of resistant bacteria in the environment would require actions of control and environmental sanitation due to the impact that could represent on public health.

Se investigó la sensibilidad a carbapenemes en 238 aislamientos de Pseudomonas spp. recuperados de muestras ambientales. En 198 (128 aislamientos con sensibilidad intermedia/resistencia a imipenem (IMP) y/o meropenem (MER) y 70 sensibles a ambos antimicrobianos) de los 238 aislamientos estudiados, se investigó fenotípica y genotípicamente la producción de carbapenemasas. El 8,8% de los aislamientos fue resistente a IMP y el 25,2% a MER. Nueve cepas recuperadas de agua mostraron fenotípicamente la producción de MBL. Todas fueron identificadas como P. otitidis. En ninguno de estos aislamientos se detectó la presencia de los genes blaIMP, blaSPM, blaVIM, blaKPC, ni blaNDM. La presencia de bacterias resistentes en el ambiente, exigiría acciones de control y saneamiento ambiental dado el impacto que podría representar para la salud pública.

Pseudomonas aeruginosa is a common organism found in nature which has been recognized as an opportunistic pathogen of great clinical relevance, particularly as the main infectious agent in patients with cystic fibrosis. The high resistance levels to several commonly used antibiotics and the ability to form biofilms make P. aeruginosa a microorganism difficult to eradicate. The aim of this study was to determine the molecular characterization of 58 isolates of P. aeruginosa from adult patients with cystic fibrosis, in order to examine whether there was a correlation between molecular features and the pattern of susceptibility to antimicrobial agents. By BOX-PCR analysis, it was demonstrated that there is a high genetic heterogeneity between isolates, Nevertheless, this could not be correlated with resistance to antimicrobial agents.

Pseudomonas aeruginosa es un organismo comunmente hallado en la naturaleza que ha sido reconocido como un patogeno oportunista de gran relevancia clinica, particularmente como principal agente infeccioso en pacientes con fibrosis quistica. La elevada resistencia a muchos antibioticos de uso frecuente y la capacidad de formar biofilm convierten a P. aeruginosa en un microorganismo dificil de eliminar. El objetivo de este trabajo fue la tipificacion molecular de 58 aislamientos de P. aeruginosa obtenidos de pacientes adultos con fibrosis quistica, con el fin de analizar si habia una correlacion entre caracteristicas moleculares y el patron de susceptibilidad a agentes antimicrobianos. Mediante analisis de BOX-PCR, se demostro que existe una elevada heterogeneidad genetica entre los aislamientos, sin embargo no pudo establecerse una correlacion con la resistencia a agentes antimicrobianos.

Streptococcus agalactiae (SGB) es la primera causa de infecciones severas invasivas en el recién nacido. Penicilina es la droga de elección en la profilaxis intraparto que se realiza en la embarazada colonizada con SGB, pero en aquéllas alérgicas a los ß-lactámicos , eritromicina (ERI) y clindamicina (CLI) son las drogas de elección. Conocer los fenotipos de resistencia a ERI y CLI es crucial a la hora de prevenir esta severa enfermedad en los neonatos nacidos de gestantes colonizadas alérgicas a los ß-lactámicos. Se seleccionaron al azar 5 cepas con algún fenotipo de resistencia y cinco cepas sin ellos, mantenidas a -70 ºC, obtenidas de hisopados vagino-rectales de gestantes, entre los años 2004 y 2011. Los biotipos se determinaron con sueros del Statens Serum Institut Copenhagen, los fenotipos con test D-test, los genes ermB, ermTR y mef A con PCR . De las 5 cepas con fenotipo de resistencia, dos cepas fueron constitutivas, una inducible y dos fenotipos M. En los biotipos V y III se detectó el mayor número de genes de resistencia. El gen de resistencia más comunmente detectado fue el ermB seguido de mef A. Alguno de los genes de resistencia investigados fueron detectados en tres cepas sin fenotipo de resistencia. El conocer la asociación de biotipos, fenotipos y genes de resistencia a ERI y CLI, circulantes en la región, datos aún no existentes, colabora en la salud individual y colectiva en profilaxis y tratamientos y en el diseño de estrategias vacunales, aún en marcha.

Introduction: Although Streptococcus agalactiae is commensal of the gastrointestinal and genitourinary tract, it is the main cause of invasive diseases and mortality in newborns. The infection can be acquired through the aspiration of infected amniotic fluid or during the passage through the birth canal. Objectives: to compare the effectiveness of various methods for the conservation of Streptococcus agalactiae strains that can be reproducible and accessible to laboratories of low and medium complexity and guarantee their phenotypic and genotypic stability through a preservation method called continuous subculture, for the maintenance of the culture in an adequate environment with fresh medium transfers at variable interval periods. Methods: 40 strains of Streptococcus agalactiae were randomly selected, which were subjected to verification of viability, purity and genotypic and phenotypic characterization before and after being subjected to conservation, using identical environments, reactive and methodologies in both circumstances. Different means of preservation of strains were tested, which allowed laboratories of low and medium complexity their transfer to specialized centers for the proper surveillance of the organism. The strains were kept for nine months with subcultures that showed original characteristics. Results: The most effective environments were ATS-TA and LD-4 % -SO-20 ºC because they guaranteed viability, purity and genotypic and phenotypic stability of the strains. It was shown that the use of this environment is an adequate alternative for the conservation of Streptococcus agalactiae in laboratories where lyophilization and dessication are not available and are low cost, fast and very easy to use in regular practice. Conclusions: The ATS-TA and LD-4 % -SO-20 ºC environments are a good alternative for short periods of preservation and transportation of Streptococcus agalactiae strains in laboratories of low and medium complexity.

Introducción: Si bien Streptococcus agalactiae es comensal del tracto gastrointestinal y genitourinario, es la principal causa de enfermedades invasivas y de mortalidad en niños recién nacidos. La infección puede adquirirse a través de la aspiración de líquido amniótico infectado o durante el paso por el canal de parto. Objetivos: comparar la utilidad de diversos métodos de conservación de cepas de Streptococcus agalactiae que resulten reproducibles, accesibles a laboratorios de baja y mediana complejidad, y asegurar su estabilidad fenotípica y genotípica mediante el método de preservación llamado subcultivo continuo, para el mantenimiento del cultivo en medio adecuado con transferencias a medio fresco a intervalos variables. Métodos: Se seleccionaron al azar 40 cepas de Streptococcus agalactiae, las que se sometieron a verificación de viabilidad, pureza y caracterización fenotípica y genotípica antes y después de ser sometidas a conservación, utilizando idénticos medios, reactivos y metodología en ambas circunstancias. Se probaron diferentes medios de preservación de las cepas, que permitieran a laboratorios de baja y mediana complejidad su traslado a centros especializados para la vigilancia adecuada del organismo. Las cepas se conservaron durante nueve meses con subcultivos que mostraron las características originales. Resultados: Los medios más efectivos fueron ATS-TA y LD 4 %-SO-20 ºC, ya que garantizaron viabilidad, pureza y estabilidad fenotípica y genotípica de las cepas. Se demostró que el uso de este medio es una alternativa adecuada para la conservación de Streptococcus agalactiae en laboratorios donde la liofilización y la desecación no están disponibles y que son de bajo costo, rápidos y muy fáciles de usar en la práctica habitual. Conclusiones: los medios ATS-TA y LD 4 %-SO-20 ºC constituyen una buena alternativa para cortos períodos de preservación y transporte de cepas de Streptococcus agalactiae en laboratorios de baja y mediana complejidad.

With the aim to compare simple phenotypic methods for detecting metallo-β-lactamases in low complexity laboratories, we studied 15 Pseudomonas aeruginosa strains resistant or with decreased susceptibilityto carbapenems, collected from in-patients at health centers of Posadas between April 2007 and March 2008. The methods tested were the modified Hodge test, the double disk synergy test (imipenem/EDTA and imipenem/ dipicolinic acid), the imipenem-EDTA combined disk test, the modified Hodge test, and the MIC of imipenem vs imipenem/EDTA. MIC reduction with imipenem/EDTA combination was observed in 1/15 strains studied. Only the modified Hodge test and the modified Hodge test gave results comparable to the ones obtained with the MIC. Considering our results, we suggest the implementation of at least two methods, selected according to the technical capabilities of the laboratory, in order to investigate metallo-β-lactamases, both in clinical practice and for surveillance purposes.

A fin de comparar métodos fenotípicos sencillos para detectar metalo-β-lactamasas en laboratorios de poca complejidad, estudiamos 15 aislamientos de Pseudomonas aeruginosa resistentes o con susceptibilidad disminuida a carbapenemes, recuperadas de pacientes hospitalizados en centros de salud de Posadas entre abril 2007 y marzo 2008. Los métodos ensayados fueron el test de Hodge modificado, el ensayo de sinergia con doble disco (imipenem/ EDTA e IMP/ ácido dipicolínico), el ensayo combinado con discos imipenem-EDTA, el ensayo microbiológico EDTA/ imipenem, y la CIM a imipenem vs imipenem /EDTA. La reducción de la CIM a imipenem al adicionar EDTA se observó en 1/15 cepas estudiadas. Solo el método de Hodge y el ensayo microbiológico dieron resultados comparables a los obtenidos con la CIM. Considerando nuestros resultados, sugerimos implementar al menos dos métodos, seleccionados según las capacidades técnicas del laboratorio, para investigar metalo-β-lactamasas, tanto en la práctica clínica como con fines de vigilancia.

The aim of this work was to study the distribution of a gene associated with Streptococcus agalactiae (Group B Streptococcus, GBS) virulence in colonizing isolates from pregnant women and invasive isolates from newborn infants. We also aimed to contribute with useful data for epidemiological studies and formulation of a regional vaccine. A total of 34 colonizing isolates and 7 invasive isolates was analyzed for detection of rib gene by specific PCR. The rib gene was present in 87.8 % of the isolates, without significant differences (p>0.05) between colonizing and invasive ones. It was concluded that in the population studied, the rib gene in GBS strains was distributed comparably in colonizing isolates from pregnant women and invasive isolates from newborn infants with severe disease.

El objetivo de este trabajo fue estudiar la distribución de un gen asociado a la virulencia de Streptococcus agalactiae (Streptococcus Grupo B, SGB) en aislamientos colonizantes recuperados de mujeres embarazadas y aislamientos invasivos recuperados de neonatos, y de contribuir con datos útiles para estudios epidemiológicos y para la formulación de una vacuna regional. Un total de 34 aislamientos colonizantes y 7 aislamientos invasivos fueron analizados para detectar el gen rib por PCR específica. Se detectó la presencia del gen rib en el 87,8 % de los aislamientos, sin diferencias significativas (p>0,05) entre colonizantes e invasivos. Concluimos que en la población estudiada, el gen rib en cepas de SGB se distribuye comparablemente en aislamientos colonizantes recuperados de mujeres embarazadas y en aislamientos invasivos recuperados de neonatos con enfermedad severa.

Streptococcus agalactiae or Group B Streptococcus (GBS) is one of the major causes of serious neonatal infection. Given the importance of their detection, the aim of this study was to identify the types of blood (human, bovine, equine, and ovine blood) that provide better yields for the isolation and identification of GBS. They could be used in laboratories of low and medium complexity. In 30 GBS strains of collection studied, the best yields (number, size, degree of hemolysis of the colonies and results of CAMP's test obtained with bovine and ovine blood. We suggest the use of ovine or bovine blood for the recovery and identification of GBS in laboratories of medium and low complexity, thus avoiding the risk of using human blood.

Streptococcus agalactiae o Streptococcus grupo B (SGB) es una de las causas principales de infección neonatal grave. Dada la importancia de su detección, el objetivo de este estudio fue identificar los tipos de sangre (humana, bovina, equina y ovina) que provean mejor rendimiento para el aislamiento e identificación de SGB y que puedan ser utilizados en laboratorios de baja y mediana complejidad. En 30 cepas de SGB de colección estudiadas, los mejores rendimientos (número, tamaño, grado de hemólisis de las colonias y resultados de la Prueba de CAMP) se obtuvieron con sangre bovina y ovina. Sugerimos, el uso de sangre ovina o bovina para la recuperación e identificación de SGB en laboratorios de mediana y baja complejidad, evitando así el riesgo que significa el uso de sangre humana.

We studied 21 Aeromonas strains involved in extraintestinal infections diagnosed in health centers of Posadas in the period 2002-2006. A 90.5 % of the isolations were coming from skin, wounds and bone infections. The average age of the patients was 53 years old, with predominance of males. The susceptibility to different antimicrobial agents was determined. Hydrolysis on ß-lactams and the presence of ß-lactameses were investigated by the iodometric method on agar and by phenotypic methods, respectively. All of the strains showed hydrolytic activity in front of two or more ß-lactams. By phenotypic methods, the production of inducible ß-lactamases was detected but no ßLEE and metallo-ß-lactamases were detected. Our results support the hypotheses that it would be possible that the resistance acquired in Aeromonas spp. is associated to the use of antimicrobial agents and mediated by enzymatic mechanisms and selective pressure caused by excess of prescriptions.

Estudiamos 21 cepas de Aeromonas involucradas en infecciones extraintestinales diagnosticadas en centros de salud de Posadas en el período 2002-2006. El 90,5 % de los aislamientos provenían de infecciones de piel, partes blandas y hueso. La edad promedio de los pacientes fue de 53 años, con predominio del sexo masculino. Se determinó la sensibilidad a diferentes antimicrobianos. La hidrólisis de ß-lactámicos y la presencia de ß-lactamasas se investigaron por el método iodométrico en agar y por métodos fenotípicos, respectivamente. Todas las cepas mostraron actividad hidrolítica frente a dos o más ß-lactámicos. Se detectó fenotípicamente la producción de ß-lactamasas inducibles no así la de ßLEE ni de metalo-ß-lactamasas. Nuestros resultados apoyan las hipótesis de que sería posible que la resistencia adquirida en Aeromonas spp. esté asociada al uso de antimicrobianos y mediada por mecanismos enzimáticos y presión selectiva causada por exceso de prescripciones.

O objetivo deste estudo foi determinar a suscetibilidade de aeromonas de origem alimentar a carbapenems bem como investigar a presença de um gene codificante de metalocarbapenemase, denominado "cph A". A suscetibilidade in vitro foi determinada pelo metodo de diluição em agar. Todas as cepas foram suscetíveis a Imipenem, Meropenem e Biapenem. Porém foi observado um forte efeito de tamanho do inóculo sobre as CIM das carbapenems na maioria das cepas. A detecção de metalo-beta-lactamase foi realizada pelo metodo lodometrico. Seis cepas das sete testadas demostraron a presença da enzima. A presença do gene cphA foi determinada por PCR e foi detectada em duas cepas de A veronii bv. sobria.

The purpose of this study was to determine the susceptibilities of food-borne Aeromonas to carbapenems, as well as to investigate the presence of a metallo carbapenemase-encoding gene, named cphA. Minimum Inhibitory Concentration (MIC) was determined following NCCLS standards. All the tested microorganisms were susceptible to imipenem, meropenem and biapenem. However, a strong inoculum size effect on carbapenem MICs was observed for most of the strains. Six strains, out of seven, showed the presence of metallo--beta-lactamases but cphA gene was detected in only two strains of A. veronii bv. sobria.

E. coli é o principal agente envolvido na produção de diarréias nos países em desenvolvimento. O objetivo deste estudo foi avaliar o tempo de aparição da primeira infecção assintomática pelas diferentes categorias de E. coli causadoras de diarréias em 44 crianças desde o nascimento e durante os primeiros 20 meses de vida. Em todas as crianças estudadas foram detectadas algumas categorias de E. coli causadoras de diarréia ao longo dos 20 meses do estudo. Durante o estudo foram obtidas 510 E. coli causadoras de diarréia (33,5%) a partir das 1524 amostras colectadas das 44 crianças (31,4% EAggEC, 28,8% EPEC, 27,1%DAEC e 12,7% ETEC). Não foram detectadas nem EHEC e nem EIEC. A idade média para a colonização pelas E. coli produtoras de diarréia foi de 7,5 meses. O período médio até o desmame foi de 12,8 meses e a idade média para a introdução de alimentação mista foi de 3,8 meses. Uma incidência significativamente baixa de diarréia e infecções assintomáticas foi registrada na época de amamentação exclusiva em relação às crianças com alimentação mista e àquelas que já não mamavam. Para ETEC, EPEC e EAggEC, a introdução de alimentos ao desmame e ao final da amamentação estiveram associadas com um aumento das infecções assintomáticas.

Diarrheagenics Escherichia coli are the major agents involved in diarrheal disease in developing countries. The aim of this study was to evaluate the time of appearance of the first asymptomatic infection by the different categories of diarrheagenic E. coli in 44 children since their birth and during the first 20 months of their lives. In all of the children studied, we detected at least one category of diarrheagenic E. coli through the 20 months of the study. 510 diarrheagenic E. coli (33.5%) were obtained from the 1,524 samples collected from the 44 children during the time of the study (31.4% EAggEC, 28.8% EPEC, 27.1% DAEC, and 12.7% ETEC). Neither EHEC nor EIEC were identified. The median age for diarrheagenic E. coli colonization was 7.5 months. The mean weaning period was 12.8 months and the mean age for introduction of mixed feeding (breast fed supplemented) was 3.8 months. A significantly lower incidence of diarrheal disease and asymptomatic infections was recorded among the exclusively breast-fed rather than in the supplemented and non breast-fed infants. For ETEC, EPEC and EAggEC the introduction of weaning foods and complete termination of breast-feeding were associated with an increase of asymptomatic infections.

Children under five years of age, from two communities of different socio-economic strata (97 from Zaiman and 55 from Las Dolores) were examined epidemiologically during 2 years, by means of quarterly visits of the working team, who carried out the collection of faecal samples. During the study, one or more enteropathogens were identified in 73.9% of samples in children from Zaiman and in 58.3% of the samples from Las Dolores, being associated to diarrhoea in 70.5% and to asymptomatic infections in 65.7%. The number of diarrheic episodes was higher in Zaiman (15.45%) than in Las Dolores (12.35%), being more frequent in the spring-summer seasons. In Zaiman, the bacterial enteropathogen proportion was relevantly higher (p< 0.005) in children with diarrhoea, whereas the presence of parasites was more frequent in asymptomatic children (p< 0.01). Rotavirus had an even distribution within diarrheic and asymptomatic children. In Las Dolores, no relevant differences were found in the detection of enteroparasites between diarrheic and asymptomatic children. Mixed infections were detected; enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC)-rotavirus and ETEC-parasites being the most frequent ones. ETEC was involved in 85% of these infections. These data, together with the high enteropathogen carriage, suggest an elevated level of environmental contamination. The latter plays an important role in diarrheic diseases, and added to the most extreme poverty, it affects children's lives.

Niños menores de cinco años de edad de dos comunidades de diferente condición socio-económica (97 del Barrio Zaimán y 55 del Barrio Las Dolores), fueron vigilados epidemiologicamente durante 2 años, mediante visitas trimestrales del equipo de trabajo, el que realizó la toma de muestras fecales. Durante el estudio, se identificaron uno o más enteropatógenos en el 73,9% de las muestras de niños del Barrio Zaimán y en el 58,3% de Las Dolores, estando asociados a diarrea en un 70,5% y en infecciones asintomáticas en un 65,7%. El número de episodios de diarrea fue superior en Zaimán (15,5%) que en Las Dolores (12,4%), presentándose con mayor frecuencia en los meses de primavera-verano. En el Barrio Zaimán la proporción de enteropatógenos bacterianos fue significativamente mayor (p < 0.005) en los niños con diarrea, mientras que los parásitos se presentaron con mayor frecuencia en niños asintomáticos (p < 0.01). Rotavirus tuvo una distribución comparable en niños con diarrea y asintomáticos. En el Barrio Las Dolores, no se encontraron diferencias significativas en la deteccion de enteroparásitos entre asintomáticos y niños con diarrea. Se detectaron infecciones mixtas, siendo ECET-rotavirus y ECET-parásitos, las mas frecuentes. ECET estuvo involucrado en el 85%; de las mismas. Estos datos y la elevada portación de enteropatógenos, sugieren un alto nivel de contaminación ambiental, la cual juega un rol importante en la enfermedad diarreica, que sumada a la pobreza más extrema, afecta la vida de los niños